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定性pcr仪与定量pcr之间的区别看完就明白了
  pcr仪是分子生物学领域中常用设备,主要是模拟人体内DNA的双链复制,从而衍生出更多的样本量。现在市面上的pcr仪主要是可分为两大类:定性pcr仪和定量pcr仪。定性pcr仪,顾名思义,是用来做定性pcr实验所需的仪器,定量pcr仪,同理是用来做定量pcr实验的仪器。
 
  定性pcr仪,又可称之为:基因扩增仪/普通pcr仪,基因扩增热循环仪/梯度pcr仪等,是指用来进行基因/核酸/DNA体外选择性扩增的仪器。
 
  一般只做基因的选择性扩增放大使用,不做结果检测以及分析使用。其后期结果检测以及分析,需要配合电泳仪,凝胶成像系统/紫外分析仪使用。其价值量相对较小,价格2-10万不等。
 
  定量pcr仪,又叫实时荧光定量pcr检测系统/实时荧光定量pcr仪/荧光定量pcr仪等,是pcr仪中最为一种pcr仪,其兼备基因的扩增以及检测的功能,且是通过荧光进行定量检测,结果更为准确、可靠。
 
  仪器价值量主要是依据其样本通量鞥因素而定,市场上常用双通道/四通道,多为96孔,价值量一般在15-80万不等,国产相对较低,进口较高,384孔或者多通达价值量较大。
 
  定量PCR是以PCR扩增为基础的,而PCR扩增是有规律可循的。定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。对于一个给定的待扩增基因片段,其在样品中的起始含量越大,则指数扩增过程越短,当扩增速率趋于稳定后,则无论原来样品中起始模板含量多少,扩增片段的含量通常是一样的。一般应预先对待测基因片段进行扩增动力学分析以了解其指数增长阶段。
 
  如果用N0代表PCR反应体中的原始模板数,n为扩增次数,N为扩增产物量,那么理想的扩增结果应该是N=N0×2n。但实际上DNA的每一次复制都不完全,即每一次扩增中,模板不是呈2倍增长。如果用E代表扩增效率(指每次循环中参与复制的模板与总模板的比率),那么N=N0(1+E)n。
 
  而且E在整个PCR扩增过程中不是固定不变的。研究表明[30],当N0在1-105拷贝之间,循环次数n≤20次时,E相对稳定,原始模板以相对固定的指数形式增加,适合定量分析;随着循环次数n的增加(>20次),E值逐渐减少,N呈非固定的指数形式增加,最后进入平台期。
 
  因此,于实际工作中,在控制原始模板的浓度范围及循环次数的情况下,通过PCR产物量计算原始模板量是完全可行的。
 
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