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想知道如何从血液提取DNA不妨看看这些
  血液中DNA提取的原理如果以外周血为DNA提取材料,在外周血中提取DNA就是从有核的白细胞中提取DNA。
 
  因此,从外周血中提取DNA包括以下几个关键步骤:
 
  第一,破坏红细胞,通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异,先使红细胞裂解,经离心后收集白细胞;
 
  第二,白细胞裂解:使膜蛋白和核蛋白变性,遊离DNA,通常是采用离子型表面活性剂使蛋白质变性;
 
  第三,除去变性蛋白质:通常采用蛋白沉淀剂沉淀变性蛋白质,使DNA留在上清液中;
 
  第四,在高盐环境下使DNA从有机溶剂如无水乙醇中析出。
 
  下面我们具体的来讲解一下血液DNA提取步骤
 
  (1) 将冰冻的血在室温下溶化;
 
  (2) 取1ml血液转入一无菌的2ml离心管中,加入等体积的PBS磷酸盐缓冲液,充分混匀后12000rpm离心5min,弃上清;
 
  (3) 加入667µl STE,24µl的20%的SDS,37℃水浴1h;
 
  (4) 加10µl的20mg/ml的蛋白酶K混匀,55℃水浴消化过夜(10~14h);
 
  (5) 将消化的样品加入等体积的Tris饱和酚,充分摇匀,12000rpm离心10min;
 
  (6) 将上层水相转入另一无菌2ml离心管中;再加入等体积的Tris饱和酚,充分摇匀,12000rpm离心10min;
 
  (7) 将上层水相转入另一无菌2ml离心管中;并加入等体积的酚∶氯∶异戊醇(25∶24∶1),旋涡振荡至充分混匀,12000rpm离心10min;
 
  (8) 将上层水相转入另一无菌2ml离心管中;并加入等体积的氯∶异戊醇(24∶1),充分振荡混匀,12000rpm离心10min;
 
  (9) 将上清液转移到另一无菌2ml离心管中;加入2倍体积的冰乙醇,1/10体积醋酸钠水平摇动,直到可见絮状DNA析出;
 
  (10) 将样品置-20℃冰箱冷冻30min或冰浴15~20min,取出后再次12000rpm离心10min,使DNA沉淀;
 
  (11) 用枪头将DNA挑到另一无菌离心管中,用适量的70%乙醇洗涤并晃动,以洗出DNA的杂质;
 
  (12) 倒出乙醇,将DNA用真空干燥或自然晾干,加入适量的TE缓冲液回溶,-20℃保存备用。
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