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非酶DNA清除剂

非酶DNA清除剂

简要描述:

非酶DNA清除剂


英文名称:DNA Erasol

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:现货

其他:

产品时间:2020-03-25

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非酶DNA清除剂

产品介绍:

非酶法去除DNA

非酶DNA清除剂

产品及特点 

用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些

污染会影响下游的 RT-PCR 和 Northern 杂 交 等 实 验 。 目 前常 用 的

RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整

性而具有很大缺陷。非酶法DNA清除剂不但彻底避免了

RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比

高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。

1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA

分子完整性不会受到任何影响。

2. 不含RNase污染,因为本产品为非酶产品, 所用溶液又经过的

液 相 RNase 清 除 剂 的 处 理 ( 能 不 可 逆 地 灭 活 RNase) ; 而 在 制 备

RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,

所以终产品中往往残留有RNase污染。

3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟,不需要37℃保温和

酚/绿仿抽提;而使用RNase-free DNase时,需要上述处理,增加了污

染RNase的可能性。

4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free

DNase的运输和长期保存必须在低温进行。

5. 性价比高,单位成本远低于 RNase-free DNase。

6. 只能回收长度在 200nt 以上的 RNA(DNA Erasol-2 可以回收长度在

200nt 以上和以下的 RNA)。

 

运输及保存 常温运输、4℃保存,有效期一年。

自备试剂 70%乙醇

使用方法 1. 将总 RNA 溶液与 DNA Erasol 按 3:1 的比例混合(即 300 uL RNA

溶液需加 100uL DNA Erasol)。

2. 12000-15000 g 室温离心 10 分钟后小心弃上清,

3. 在沉淀中加入 1 mL 自备 70%乙醇,震荡半分钟。

4. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟后小心弃上清。

5. 将离心管短暂快速离心,小心吸弃余液。

6. 加入适量 RNase-free 水或液相 RNase 清除剂溶解 RNA 沉淀,立即使

用或放-80℃长期保存。

注意:本产品只能回收长度在 200nt 以上的 RNA,RNA 样品中含有小 RNA,

将会丢失。对如果要去除小 RNA 样品中的 DNA 污染,建议使用的

DNA Erasol-2(CAT#:70801)

使用效果 图注:在RNA中加入DNA污染,然后将样品

分为A和B两组,A不经本产品处理而B经过处

理,然后分别将A和B稀释1(原液),10,100

和1000倍,后取5 uL进行PCR。A样品稀释

100倍后还有扩增,而B样品原液也只有很微

弱的扩增。

相关资料 RNase-free DNase 制备方法

去 除 DNase 中 RNase 的 方 法 有 agarose-coupled amino

phenylphosphoryl-uridine-2' (3')-phosphate 亲和吸附法(NAR,4:241,

1977) ,DEAE-cellulose 吸附法(Anal. Biochem.14:269 , 1966),

Macaloid 吸附法 (Molecular Cloning p452, 1982)和 Iodoacetate 灭活

法 (JBC 244:924,1969)。从原理上将讲,用吸附法彻底去除 RNase 几乎

是不能的,就如想在温和条件下让一个化学平衡反应只向一个方向进行一样。

另外,当时检测 RNA 完整性的方法是靠最原始的密度梯度离心法,十分粗糟。

即便用这样的方法,数篇文章都提到残留的 RNase 十分难以去除。研

究表明,在 E.coli 细胞中就存在 20 余种 RNase,而作为原材料的牛胰 DNase

所含 RNase 种类肯定也不在少数,用特异性本来就很差的吸附法同时去除

DNase 粗产品中的各种 RNase 几乎是不可能的。初步的实验结果

也显示,使用上述方法非常难以得到真正的 RNase-free DNase。所以使用

RNase-free DNase 时一定要严格按厂家提供的操作手册执行,过长时间的

保温和用量都有可能降解您珍贵的 RNA。

疑难解答 Q: 能否将本产品用于去除蛋白质溶液中的 DNA?

A: 不能,只能用于去除 RNA 溶液中的 DNA 污染。

 

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