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线状DNA清除剂

线状DNA清除剂

简要描述:

线状DNA清除剂


英文名称:Linear DNA Erasol

运输:低温

保存:负20℃

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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线状DNA清除剂

产品介绍:

酶法专一性去除线状的双链DNA

线状DNA清除剂

产品及特点 

分离纯化环状DNA(质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA)

的时候经常需要去除其中的基因组DNA污染,否则会对后续的PCR、WGA和测序等

反应产生干扰。而基因组DNA一般都十分巨大,无论是线状(如真核细菌基因组

DNA)还是环状(如细菌DNA),经过常规的DNA纯化过程都会变成20-50 Kb大小的

线状DNA,而上述环状DNA一般还能保持环状构型。根据这一特点,本公司开发了

专门用于去除线状DNA的本产品,它有如下优点:

1. 即开即用,不需用户花费大量时间去摸索各种条件。

2. 酶法去除线性DNA,专一性强,可以使线状DNA污染降级几个数量级,不会干

扰后续试验。

3. 不降解有nick和gap的环状DNA,包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、

环状病毒DNA。

4. 处理不依赖于DNA序列,可降解任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要

预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。

5. 得到的环状DNA可用于多种后续试验,尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感

的试验。

 

运输及保存 低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法 1. 在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30 uL体系):

成份 样品 正对照 负对照

DNA(1-10 ug) 自备样品 DNA 自备环状 DNA 自备线状 DNA

溶液 A 3 uL 3 uL 3 uL

溶液 B 1 uL 1 uL 1 uL

自备超纯水 补到 30 uL 补到 30 uL 补到 30 uL

2. 加200 uL石蜡油后,37℃保温16小时。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不

加石蜡油。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,

所以保温16小时。由于保温时间太长,不加石蜡油或不开热盖则反应体

系中的水分在16小时的保温期间会蒸发到管盖上,严重影响反应的正常进行。

3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。

4. 反应液可以直接使用。如果需要纯化,则将30 uL酶反应溶液转移到一个新的

1.5 mL离心管中,再加入60 uL 微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油,则

直接在30 uL酶反应溶液中加入60 uL 微量核酸沉淀剂。注意:微量核酸沉

淀剂有沉淀,取用前需要充分摇匀。

5. 室温15000 g离心10分钟。

6. 弃上清后加自备的75%乙醇1 mL,振荡混匀。

7. 15000 离心3-5分钟,弃上清。

8. 再短暂离心后小心吸弃上清,沉淀即为回收的DNA沉淀,可溶于自备超纯水中

后直接使用或放-20℃冰箱长期保存。

 

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