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柱式植物DNA提取试剂盒

柱式植物DNA提取试剂盒

简要描述:

柱式植物DNA提取试剂盒


英文名称:Column Plant DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式植物DNA提取试剂盒

产品介绍:

柱式法提取植物DNA

柱式植物DNA提取试剂盒

产品及特点 

本产品是在植物 DNA提取 基础上开发的柱式植物基因组 DNA 提取产品,

可以用于多种植物基因组 DNA(含叶绿体和线粒体 DNA)的快速提取。

1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex

PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis 等

各种后续分子生物学实验。

2. 产率一般在 3-30 ug/100 mg 样品。OD260/280 一般在 1.8 以上。DNA 片段

长度一般在 40-50 Kb 左右。

3. 适用范围广,可以使用于绝大多数植物的各种组织。

4. 不会发生离心柱堵塞现象。

运输及保存 常温运输和保存,有效期一年

自备试剂 绿仿

使用方法 注意:溶液 A 和溶液 B 容易产生沉淀,溶液 B 比较粘稠,用前均需要放置在 65℃预

热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。

1. 65℃预热柱式植物 DNAout 溶液 A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取 0.75 mL

加入到 10 mL 塑料离心管中并放置于 65℃待用。

2. 称取植物组织 0.1-0.5 g 左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液 A 的 10 mL 塑料

离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻

璃研钵中破碎细胞,因为二氧化硅会非特异地吸附 DNA,降低 DNA 回收量。但

可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。

3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的 1.5 mL 塑料离心管(此时匀浆液较为粘

稠,可将枪头剪去一截后转移上清, 不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。

4. 在匀浆液中加入 0.5 倍体积预热的溶液 B 到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液

中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液 B 比较粘稠,可以将 1 mL 枪头剪去一

截再吸取)。

5. 65℃水浴 3-5 分钟。如果室温放置,DNA 产量会降低 10-20%。

6. 加入 200 uL 自备绿仿,震荡混匀 10-30 秒,此时溶液将呈乳白色。

7. 12,000 rpm 室温离心 2 分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转

移上清液到一个新的 1.5 mL 塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。

8. 加入 1.5 倍体积的溶液 C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少 2

分钟。

9. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中

的穿透液。

10. 将 0.5 mL 通用洗柱液加入离心柱中,12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃穿透液。

11. 重复上步操作一次。

12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的 1.5 mL 离心管中。

13. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5mL 塑料离心管中,加 50-100 uL DNA 洗脱液

2.0,室温放置 3-5 分钟。

14. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟即得植物 DNA 溶液。

15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附 DNA 的能力较强,可以重复上步操作一次,以

洗脱得到更多的 DNA。

16. 直接取 5-10 uL 电泳检测 DNA,其余放冰箱备用。

 

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