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中草药DNA提取试剂盒

中草药DNA提取试剂盒

简要描述:

中草药DNA提取试剂盒


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运输:常温

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有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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中草药DNA提取试剂盒

产品介绍:

沉淀法提取中药材DNA

中草药DNA提取试剂盒产品及特点 

基于 PCR 的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产

业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材

DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,

所以从中药材中提取可以用于 PCR 的 DNA 比从新鲜植物中提取要困难很多。为解

决这一问题,天泽基因在植物 DNAOUT 产品基础上开发了本产品。其特点如下:

1. 适合于大多数药材。

2. 得到的 DNA 纯净,OD260/280 一般都在 1.6 以上,原液或 100 倍之内的稀

释液一般都能直接作为 PCR 模板。

3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。

4. 试剂无毒无害,环保卫生。

 

使用方法 1. 65℃预热溶液 A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取 0.75 mL 加入到 10-15mL

的塑料离心管中并放置于 65℃待用。

2. 称取 20 mg 左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的

溶液 A 中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨

后将中草药粉末加入到预热的溶液 A 中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,

因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附 DNA,降低 DNA 回收量。但可以在

塑料研钵中研磨)。

3. 将匀浆液置于 65℃水浴保温 5 分钟,然后全部转移到新的 1.5mL 塑料离心管

中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。

4. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,将上清转移到新的 1.5mL 塑料离心管中(上

清液的体积一般为 200-700 μL,如果体积超过 700 μL,多余部分可以不要)。

有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处

理。

5. 在上清液中加入等体积的溶液 B,上下颠倒 30 秒充分混匀(溶液将呈白色混

浊状),然后置冰浴中 5 分钟。

6. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,转移上清到新离心管中。

7. 加入 0.2 mL 的绿仿(自备),震荡器上充分振荡 30 秒混匀。

8. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上

清到新离心管中。

9. 重复绿仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。

10. 加入 0.6-1 倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒 30 秒混匀。

11. 12000-15000 g 离心 5 分钟,弃上清,管底将有微小 DNA 沉淀。

12. 沉淀用 75%乙醇清洗 2 次后,室温晾干。

13. 加入 50-100 μL 自备缓冲液(如 TE)溶解沉淀。DNA 即可用于电泳,酶切和

PCR 等反应。如果需要测 OD,则必须乙醇沉淀去除降解的 RNA。注意:用本

产品提供的 RNase 处理 DNA 样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的

方法彻底去除其中的 DNase。

使用效果 用本产品成功提取到可以扩增的 DNA 的中药材部分列表(OD 为三次实验平均值)

中药材 拉丁名      OD260/280 可扩增模板

黄 Caulis Ephedrae 1.68      原液

肉桂 Cortex Cinnamomi 1.73     原液

当归 Radix Angelica 1.69      1/100 稀释液

天冬 Radix Asparagi 1.50      原液

柴胡 Radix Bupleuri 1.60      原液

菊花 Flos Chrysanthemi. 1.78 1/10 稀释液

党参 Radix Codonopsis 1.72    原液

甘草 Radix Glycyrrhizae 1.80   原液

板蓝根 Radix Isatidis 1.68    原液

车前子 Semen Plantaginis 1.60  原液

桔梗 Radix Platycodi 1.68      原液

 

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