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柱式血清/血浆游离DNA提取试剂(cfDNA)

柱式血清/血浆游离DNA提取试剂(cfDNA)

简要描述:

柱式血清/血浆游离DNA提取试剂(cfDNA)

英文名称:Column Serum/Plasma Circulating DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式血清/血浆游离DNA提取试剂(cfDNA)

产品介绍:

提取血清血浆游离DNA

柱式血清/血浆游离DNA提取试剂(cfDNA)产品及特点 

本产品是基于离心柱层析法,用于从血浆/血清中方便、快速、可靠地提取游离循环 DNA(circulating DNA、cell-free DNA,cfDNA)。本产品可用于从新鲜或冷

冻血浆/血清样品中分离各种大小的 cfDNA,它具有下列特点:

1. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右。

2. 不需要额外在洗柱液中补加乙醇。

3. 安全无毒,不需要使用苯酚和绿仿等有机溶液。

4. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。

5. 可在 30 μL~100 μL 范围内灵活调节洗脱体积浓缩循环 DNA。

6. 适用于各种血清和血浆。

 

运输及保存 常温运输及保存,柱式血清/血浆游离 DNA 溶液 A 长期(1 月以上)放置时需要放 4℃。

有效期一年。

自备试剂 无,但需要自备 RNase-free 的 1.5 mL 离心管(耗材)。

使用方法 1. 如果有 N 个样品,标记 N+2 个 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管(如 Sarstedt

CAT#:782.694.006),多出的一个为阳性对照(PC),一个为阴性对照(NC)。

为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记,以在后续

操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入 0.2 mL 血清或血浆,在

PC 管中加入已经确认有阳性 DNA 的血清或血浆,在 NC 管中加入已经确认没有

阳性 DNA 的血清或血浆。

2. 加入 0.6 mL 柱式血清/血浆游离 DNA 到各离心管中,振荡 30 秒混匀后室温放

置 10 分钟。注意:柱式血清/血浆游离 DNA 溶液 A 在 4℃放置后可能会产生结

晶,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。

3. 加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中,颠倒混匀后转移一半的混合液(0.8mL)

到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。

4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集

管中。

5. 将剩余的另外一半裂解液(0.8mL)转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。

6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集

管中。

7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心 1 分钟,弃收

集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。

8. 加入 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心 1 分钟,弃收

集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤,可以跳过。

9. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。

10. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 1.5 mL 离心管中,在离心吸附柱的滤

膜的中部加入 30uL DNA 洗脱液 3.0,然后室温放置 2 分钟。

11. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,离心管中的溶液即为游离 DNA 溶液。

12. DNA 样品可以直接用于 PCR,也可放-20℃长期保存。

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