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柱式鼠尾DNA提取试剂盒

柱式鼠尾DNA提取试剂盒

简要描述:

​柱式鼠尾DNA提取试剂盒


英文名称:Column Mouse Tail DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式鼠尾DNA提取试剂盒

产品介绍:

提取鼠尾DNA

柱式鼠尾DNA提取试剂盒产品及特点 

大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料,鼠尾则是小鼠活体样品,常用于

基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系,可以快速得高质量、高纯

度的基因组 DNA。本产品具有下列特点:

1. 即开即用,不需要自己准备各种溶液。

2. 产量高,从 0.5g 鼠尾中可以提取到约 10 μg 的基因组 DNA。

3. DNA 纯度高,OD260/280 一般在 1.7-1.9,片段大一般在 20 kb 以上。

4. 可用于后续的酶切、PCR、Southern 杂交、文库构建等实验。

5. 本产品仅供科研使用。

 

运输及保存 常温运输及保存(蛋白酶 K 溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年

自备试剂 绿仿

1. 剪取 0.5-1cm 鼠尾(约 15-30mg),尽量剪短成的 1mm 左右小段,放入干

净的 1.5 mL 塑料离心管中。若不需要立即使用,可以在液氮中或-80℃长期

放置,或-80℃放置数天。如果是动物心,肝、肾、脾和肌肉等组织,则取 30mg

左右并充分剪碎。

2. 加入 1 mL 柱式鼠尾 DNA 提取溶液 A 和 20 uL 蛋白酶 K 溶液(20 mg/mL),

37℃保温 10 小时(一般过夜保温就可以)。也可以放置于 65℃金属浴或水浴

中保温 2 小时,其间每间隔 10 分钟涡旋混匀一次(或用手指用力弹击离心管

底部数次)以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾,可以适当增加酶解时间到

3-4 小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态。,则效果更佳。

3. 加入 0.3 mL 的柱式鼠尾 DNA 提取溶液 B 和 0.2 mL 的自备绿仿,振荡器上

振荡 30 秒充分混匀。

4. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟,小心将上清转移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。

5. 在上清液中加入等体积的柱式鼠尾 DNA 提取溶液 C,上下颠倒 30 秒充分混

匀。

6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到

离心吸附柱中,室温放置 2 分钟,12,000 rpm 室温 1 分钟,弃穿透液。再把

剩余的一半上柱,重复此操作。

7. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm 室温离心半分钟,

弃穿透液。

8. 将 0.3 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心半分钟(此步

为第二次洗涤,一般可以省略)。

9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。

10. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 30-50 uL DNA 洗

脱液 2.0。

11. 12,000 rpm 离心 1 分钟,管底即为 DNA 溶液,可立即用于 PCR,也可长期

保存在-20℃。

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