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柱式软体动物DNA提取试剂盒

柱式软体动物DNA提取试剂盒

简要描述:

柱式软体动物DNA提取试剂盒


英文名称:Column Mollusk DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式软体动物DNA提取试剂盒

产品介绍:

提取软体动物的DNA

柱式软体动物DNA提取试剂盒产品及特点 

本产品是专门用于从各种软体动物组织中提取基因组 DNA 的试剂盒。其原理是

基于阳离子去垢剂 CTAB 在适当的离子强度条件下,特异地跟基因组 DNA 结合形成

沉淀,然后在用硅胶膜技术进行进一步纯化。本产品具有下列特点:

1. 适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物动物,包括螺类、贝类、

乌贼、章鱼和蜗牛等。

2. 提取到的基因组 DNA 完整性,其中最长可以到达长度一般在 20-50kb。

3. DNA 纯净,OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50 Kb 左

右,可直接用于 PCR、酶切、杂交等。

 

 

运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。蛋白酶 K 溶液需要低温运输和-20℃保存。

自备试剂 绿仿。

使用方法 1. 匀浆方法一:称取 0.1-0.3g 软体动物组织,转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉

后转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中。注意:避免使用含二氧化硅

的玻璃研钵,因为 DNA 会吸附在表面,影响得率。在离心管中加入 1 mL 溶液

A 并用移液枪头充分吹打混匀。进入第三步。

2. 匀浆方法二:将 0.1-0.3g 软体动物组织剪成小块,转移到 10-15mL 塑料管中

(培养细菌那种离心管即可),加入 1 mL,用 Polytron 式匀浆机(剪切式匀浆

机)匀浆 1 分钟左右。

3. 在样品中加入 20 uL 蛋白酶 K 溶液(20mg/mL),37℃保温 1-3 小时。注意:

让反应体系处于摇晃状态,此保温长度一般可以让样品彻底溶化。

4. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自备绿仿,振荡器上振荡 30 秒充分混匀。

5. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟,小心将上清转移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。

6. 在上清液中加入等体积的溶液 C,上下颠倒 30 秒充分混匀。

7. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到

离心吸附柱中,室温放置 2 分钟,12,000rpm 室温 1 分钟,弃穿透液。再把

剩余的一半上柱,重复此操作。

8. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm 室温离心半分钟,

弃穿透液。

9. 将 0.3 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心半分钟(此步

为第二次洗涤,一般可以省略)。

10. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。

11. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 30uL DNA 洗脱液

3.0。

12. 12,000 rpm 离心 1 分钟,管底即为 DNA 溶液,可立即用于浓度测定或 PCR,

也可长期保存在-20℃

 

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