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柱式凝固血液DNA提取试剂盒

柱式凝固血液DNA提取试剂盒

简要描述:

柱式凝固血液DNA提取试剂盒


英文名称:Column Blood Clot DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式凝固血液DNA提取试剂盒

产品介绍:

柱式法提取应为没有抗凝剂而凝固的血液DNA

柱式凝固血液DNA提取试剂盒产品及特点

 本产品是在凝固血液 DNA提取基础上改进的柱式升级产品,专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组 DNA。跟凝固血液 DNAOUT 相比,它具有下列特点:

1. DNA 更加纯净,OD260/280 在 1.8-2.0 之间,可直接用于 PCR、酶切、杂

交等。

2. 操作更加简单快捷,比凝固血液 DNAOUT 快十分钟以上。

3. 每克新鲜凝固全血 DNA 产量为 20-50 ug DNA。

4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

 

运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。 自备试剂绿仿

使用方法 1. 65℃预热溶液 A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取 1 mL 到 10 -15 mL 塑料

离心管中并将离心管放置于 65℃待用。

2. 称取凝固血液 0.1-0.5 g,加入到预热的溶液 A 中短暂匀浆(必须使用剪切式

匀浆机)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。注意:如果是干的XUE

块,用量不要超过 0.2 g,但需将干XUE块剪成微小的碎片。也可以将凝固XUE块

液氮研磨成粉后转移到装有溶液 A 的离心管中。

3. 将匀浆液置于 65℃水浴保温 5 分钟,然后将不超过 0.75 mL 的匀浆液上清转

移到新的 1.5 mL 离心管中。注意:尽量不要转移凝固血液碎片。

4. 在上清液中加入等体积的溶液 B,上下颠倒 30 秒充分混匀。

5. 冰浴 5 分钟。

6. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,将上清液转移到新的 1.5 mL 离心管中。

7. 在上清中加入 0.2 mL 的自备绿仿,震荡器上充分振荡 30 秒混匀。

8. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,两相交界面将有白色膜状物。

9. 将上清液(大约 0.6 mL)小心转移到新的 1.5 mL 离心管中。

10. 在上清液中加入 1.5 倍体积的溶液 C,上下颠倒 30 秒混匀。

11. 分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后需要 12000-15000 g 离心

半分钟并弃穿透液。

12. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液,12000-15000 g 离心半分钟。

13. 在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液,12000-15000 g 离心半分钟(此

步为第二次洗涤,一般可以省略)。

14. 12000-15000 g 离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意:此步不能省略,

否则残留的通用洗柱液会影响 DNA 的后续反应。

15. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入 30-100 uL DNA 洗脱液 2.0,

12000-15000 g 离心半分钟,管底溶液即 DNA 溶液,可立即使用或放冰箱

长期保存

 

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