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柱式昆虫DNA提取试剂盒

柱式昆虫DNA提取试剂盒

简要描述:

​柱式昆虫DNA提取试剂盒


英文名称:Column Insect DNAOUT

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:

产品时间:2020-03-25

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柱式昆虫DNA提取试剂盒

产品介绍:

柱式法提取昆虫DNA

柱式昆虫DNA提取试剂盒产品及特点 

本产品是专门用于从昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫和一些富含多糖的动物组

织中提取基因组 DNA 的试剂盒。其原理是基于去垢剂在适当的离子强度条件下,特

异地跟基因组 DNA 结合形成沉淀,然后在用硅胶膜离心吸附法进行进一步纯化得到

DNA。本产品具有下列特点:

1. 适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的动物,包括昆虫、节肢动物、

蛔虫、扁形虫等。

2. 除新鲜样品外,还适合于各种保存状态的样品,包括冷冻的样品、用乙醇保存

的样品和福尔马林保存的样品。

3. 提取到的基因组 DNA 完整性,长度一般在 20-50 Kb。

4. DNA 纯净,OD260/280 一般都在 1.8 左右,可直接用于 PCR、酶切、杂交

等。

5. 操作简单,整个过程约 30 分钟。

6. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

 

运输及保存 常温运输及保存,有效期一年。

自备试剂 绿仿。

使用方法 1. 称取 0.1-0.3 g 昆虫样品转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净

的 1.5 mL 塑料离心管中。

注意:避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为 DNA 会吸附在表面,影响得

率。

2. 在离心管中加入 1 mL 65℃预热的溶液 A 并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶

液 A 有沉淀,需先在 65℃加热溶解后摇匀再使用)。

3. 65℃保温 5-30 分钟,其间吹打混匀 2-3 次。

4. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟。

5. 将不超过 0.75 mL 的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小

悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。

6. 在上清液中加入等体积的溶液 B,上下颠倒 30 秒充分混匀,溶液将呈白色混浊

状。

7. 将其置于冰浴中放置 5-10 分钟。

8. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,转移上清到新的 1.5 mL 塑料离心管中。

9. 加入 0.2 mL 的绿仿(自备),震荡器上充分振荡 30 秒混匀。

10. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清

到新 1.5-5mL 塑料离心管中。注意:由于下一步要加 1.5 倍体积的溶液 C,所

以新的离心管的体积要足够大。

11. 加入 1.5 倍体积的溶液 C,上下颠倒 30 秒混匀,然后分多次的将混合液转移到

离心吸附柱中。

12. 每次转移 0.7-0.8 mL 混合液后,室温放置 5-10 分钟。

13. 12000-15000 g 室温 1 分钟,弃穿透液。

14. 对需要多次上柱的样品,可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中,重复第

12-14 步的操作。

15. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入离心柱,室温离心 1 分钟,弃穿透液。

16. 在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液,12000-15000 g 离心半分钟(此

步为第二次洗涤)。

17. 空甩 1 分钟去除残留液体。

18. 将离心柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 30-100 uL DNA 洗脱液

2.0。

19. 室温放置 5 分钟后离心 1 分钟,管底即为昆虫 DNA 溶液,可立即使用,也可

长期保存在-20℃。

20. 可以重复上步一次,以洗脱更多的 DNA。

 

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