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Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞

Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞

简要描述:

产品货名:Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞
产品货号:QCG6026
规格/简介:10X100ul
运输:干冰运输

产品时间:2020-03-27

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Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞  

 

运输与保存方法:干冰运输

 

保存温度:-80°保存

 

操作说明:

 

1. 取 100μl 冰上融化的Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上 静置 25 分钟。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞  10×100μl pUC19(control vector) 10pg/μl

2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基(2YT 或 LB),混匀后 37℃,200rpm 复苏 60 分 钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌,留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

 

注意事项:

 

1. 感受态细胞在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

 3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG 浓度可选(0.1-2mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG 浓度需实验者优化。 Sample Induction Protocol (for reference only)

 

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