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大鼠8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒

大鼠8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒

简要描述:

大鼠8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒
适应种属 Rat
检测范围 0.156-10ng/ml
灵敏度 0.094ng/ml

产品时间:2020-04-03

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产品名称

大鼠8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒

货号

QCR1877

别称

8 oxoguanine DNA glycosylase ELISA KitAP lyase ELISA KitHMMH ELISA KitHOGG1 ELISA KitMMH ELISA KitMUTM ELISA KitOGG1 ELISA KitOGH1 ELISA Kit

检测方法

Sandwich ELISA, Double Antibody

规格

96T

检测范围

0.156-10ng/ml

灵敏度

< 0.094ng/ml

种属

Rat

标准曲线

存储

4 ℃ for 6 months

变异系数(%)

批内差:CV<8%
批间差:CV<10%

注意事项

仅供科研使用


实验需准备的 材料设备

1、酶标仪

2、移液器及枪头

3、洗板机

4、试管、离心管、量筒等

5、蒸馏水或去离子水

6、电热恒温箱

液体样本的收集

1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固 10-20 分钟,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2、血浆:应根据标本的要求选择 EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。

固体样本的收集

1、组织标本:切割标本后,称取 1g 组织,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨。

2、细胞内蛋白样本:许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。

(1)培养的细胞

A、动物细胞:用 PH7.2-7.4 的 PBS 稀释细胞悬液,使细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

B、植物细胞:用 PH7.2-7.4 的 PBS 稀释细胞悬液,使细胞浓度达到 100 万/ml 左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎 2s,冷却 30s 的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

(2)组织的细胞

切割标本后,称取 1g 组织,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),去除上清,再用 pH7.2-7.4左右的 PBS 小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。

3、细胞内蛋白样本:许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。

4、咽拭子:加入 2ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。

5、植物标本:取组织块(0.2g~0.5g)最少可到 5~10mg 在冰冷的 PBS 中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入 5ml 的匀浆管中;按重量(mg):体积(ml)=1:9 的比例加入 9 倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块;匀浆的方式:手工匀浆,机器匀浆。 ① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8 分钟),充分研碎,制成 20%的匀浆液。 ② 机器匀浆:用组织捣碎机 10000~15000 转/分 上下研磨制成 10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间 10 秒/次,间隙 30 秒,连续 3~5 次,在冰水中进行,可适当延长匀浆时间),镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。将制备好的 10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机 4000 转/分左右,离心 10~15 分钟,取上清液进行测定。

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