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大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA Kit

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA Kit

简要描述:

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA Kit
Crh(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit
适应种属Rat
检测范围0.313-20ng/ml
灵敏度0.188ng/ml

产品时间:2020-04-15

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大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA Kit       

      

运用双抗夹心ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中(CRH)含量。

 

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA Kit组成:

 

Item

Specifications(48T/96T)

Storage

酶标板

8×6 /8×12

4°C

标准品

1 vial or 2 vial

4°C

标准品稀释液

5ml/10ml

4°C

样品稀释液

5ml/10ml

4°C

酶标检测抗体 

60ul/120ul

4°C

酶标检测抗体稀释液

5ml/10ml

4°C

TMB  A组份

2.5ml/5ml

4°C(shading light)

TMB  B组份

2.5ml/5ml

4°C

显色终止液

5ml/10ml

4°C

洗液 (25X)

15ml/30ml

4°C

封板贴

3/5pieces

 

说明书

1 copy

 

 

注意事项:

 

1.酶标板袋拆封后,尽快将不用的板孔放回,并放入干燥剂,保持酶标板干燥。

2.用户在初次使用试剂盒时,应将试剂盒平衡至室温,各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

3,TMB A液避光保存。

4,洗板过程非常重要,不充分的洗板易导致假阳性。

5.建议所有标准品、样本都做双份检测。

6.请保持试验过程的连续性,禁止酶标板干燥,因干燥会使酶标板上的生物成分迅速失活。

7.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。

8.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。

 

试验所需自备物品:

 

1. 酶标仪(450nm波长滤光片)

2. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

3. 自动洗板机

4. 高精度移液器, EP管及一次性吸头: 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

5. 吸水纸

 

 洗板方法:

 

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBt或TBT洗涤缓冲液 至少 0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 

样品收集:

 

1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。

2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA或肝素,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。

3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。然后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

5.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测

6.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。

7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。

 

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